Журнал о Медицине
rss новости rss статьи rss все архив
Словарь научных терминов

Лигандообменная хроматография

ЛИГАНДООБМЕННАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ, основана на разл. способности разделяемых соед. образовывать комплексы с катионами металлов. В зависимости от того, локализованы комплексообразующие катионы в неподвижной фазе (благодаря ионным или координац. связям) или перемещаются вместе с разделяемыми в-вами в подвижной фазе, различают хроматографию лигандов и Л. х. комплексов. В первом случае лиганды удерживаются вследствие образования смешанных т. наз. сорбционных комплексов, содержащих фиксированные группы неподвижной фазы, во втором случае комплексы распределяются между фазами. В качестве комплексообразователей используют ионы Сu2+, Ni2+, Zn2+, Cd2+ , Co2+, Mg2+ , Fe3+ и нек-рые др., комплексы к-рых лабильны, т.е. легко обменивают свои лиганды. При использовании инертных комплексов Со3+ и Сr3+ обмен лигандов осуществляется во внеш.
координац. сфере. Подвижной фазой м. б. любая жидкость, координирующаяся слабее разделяемых лигандов, или газ. В газовой Л. х. соль или комплекс переходного металла растворены в неподвижной фазе. Сорбентами служат способные удерживать катионы металлов катионообменные смолы, содержащие преим. карбоксильные группы, или селективные (комплексообразующие) смолы, в частности с аминокислотными или иминодиацстатными фиксированными группами. В высокоэффективной жидкостной Л. х. используют пористые силикагели с химически привитыми лигандами или прочно адсорбированными комплексообразующими соединениями. При Л. х. комплексов применяют любые сорбенты, если они обеспечивают удерживание разделяемых соединений. Удерживание регулируют путем изменения рН подвижной фазы, добавлением к ней орг. соед. или конкурирующих за координацию с металлом лигандов, напр. NH3.
С помощью Л. х. удается выделять и разделять соед., склонные к координации с ионами металлов, в присут. больших кол-в минер. солей и некоординирующихся в-в. Напр., с использованием иминодиацетатной смолы с ионами Сu2+ из морской воды выделяют своб. аминокислоты. На катионитах с ионами Fe3+ разделяют фенолы, с ионами Ag+ - сахара. На карбоксильных катионитах с Ni2+ разделяют амины, азотсодержащие гетероциклы, алкалоиды. На силикагеле с нанесенным слоем силиката Сu2+ в водно-орг. среде в присут. NH3 проводят быстрый анализ смесей аминокислот и пептидов, причем элюируемые из колонки комплексы легко детектируются спектрофотометричeски. На высокопроницаемых декстрановых сорбентах с иминодиацетатными группами, удерживающими ионы Zn2+, Ni2+ или Сu2+, селективно выделяются из сложных смесей индивидуальные белки и ферменты, содержащие на пов-сти своих глобул остатки гистидина, лизина или цистеина. Силикагели с фиксированными на пов-сти инертными трис-этилендиаминовыми комплексами Со3+ используют для т. наз. внешнесферной Л. х. смесей нуклеотидфосфатов. Методом газовой Л. х. с помощью фаз, содержащих соли Ag+, разделяют олефины, ароматич. соед., простые эфиры. Тонкослойная Л. х. на носителях, пропитанных солями Ag+, применяется для анализа стероидов и липидов. Особенно эффективна Л. х. при разделении изомеров, в т.ч. энантиомеров. На полистирольных сорбентах с группами оптически активных a-аминокислот, координированных с ионами Сu2+ , разделяют энантиомеры аминокислот, гидроксикислот, аминоспиртов, диаминов, получают препараты оптически активных аминокислот, меченные радиоактивными изотопами. Быстрое определение энантиомерного состава смесей аминокислот проводят с помощью силикагелей с привитыми группами, напр. N-алкилен-L-гидроксипролина или N-(n-этилбензил)-L-гидроксипролина в присут. ионов Сu2+ в элюенте. Высокоэффективный хиральный сорбент получают адсорбцией N-децил-L-гидроксипролина или октиламида L-гидроксипролина на гидрофобной пов-сти т. наз. обращенно-фазного силикагеля, модифицированного октадецилсиланом. Энантиомеры аминокислот эффективно разделяют в элюентах, содержащих оптически активные комплексы Сu2+ с проливом, N,N,N',N'-тетраметилпропилендиамином или N,N-дипропилаланином, на ахиральных стандартных сорбентах - сульфокатионите, силикагеле или обращеннофазном силикагеле соответственно. Такая модификация Л. х. носит назв. метода хирального элюента. Капиллярной газовой хроматографией на сквалане, содержащем комплексы Rh+ или Ni2+ с 3-трифторацетил-(1R)-камфорат-анионом, разделяют энантиомеры хиральных олефинов и простых эфиров. Л. х. была предложена Ф. Гельферихом в 1962. Лит.: Даванков В. А., "Ж. Всес. хим. об-ва им. Д. И. Менделеева", 1983, т. 28, № 1, с. 25-29; Davankоv V. А., Кurganov A. A., Bochkov A. S., в сб.: Advances in chromatography, v. 22, N.Y., 1983. p. 71-116; Davankov V. A., Navratil T. D., Walton H. F., Ligand exchange chromatography, N.Y., 1988. B. A. Даванков.


Здоровье и профилактика Акушерство и гинекология Стоматология Красота Зрение Энциклопеди Адреса Реклама
Видео